ارائه روش اسپکترفلوریمتری برای اندازه گیری dna تیموس گوساله و سفکسیم با استفاده از پروب تربیوم-دانوفلوکساسین

کمپلکس های لانتانیدی (مخصوصاً کمپلکس های تربیوم و اروپیوم) به علت داشتن خواص ویژه از جمله جابجایی استوکس زیاد، زمان زوال طولانی، حساسیت بالا، دقت خوب، پایداری خوب و گزینش پذیری نسبی می توانند برای اندازه گیری ترکیبات آلی، داروها، اسیدهای نوکلئیک، پروتئین ها و آثار یون های خاک نادر در محیط های پیچیده ی بیولوژیکی مورد استفاده قرار گیرند. در این روش لیگاند کمپلکس شده به لانتانید باعث انتقال موثر انرژی به تراز برانگیخته ی یون لانتانید می شود و فلوئورسانس آن را تشدید می کند. در روش مستقیم آنالیت به عنوان لیگاند عمل می کند که شدت فلوئورسانس متناسب با غلظت آن است. در روش غیر مستقیم شدت فلورسانس کمپلکس لانتانیدی(پروب) با افزایش غلظت آنالیت افزایش یا کاهش می یابد که میزان فلوئورسانس افزایش یافته یا کاهش یافته متناسب با غلظت آنالیت است. در این کار یک روش اسپکتروفلوریمتری جدید برای اندازه گیری dna تیموس گوساله (ctdna) و داروی سفکسیم با استفاده از تربیوم-دانوفلوکساسین به عنوان پروب فلوئورسانس ارائه شده است. آزمایش‏ها نشان دادند که در حضور ctdna شدت فلوئورسانس پروب تربیوم-دانوفلوکساسین افزایش می‏یابد (enhancement) و در حضور سفکسیم شدت فلوئورسانس پروب کاهش می یابد (quenching). میزان فلوئورسانس افزایش یافته یا کاهش یافته در طول موج تحریک nm 347 و طول موج نشر nm 545 متناسب با غلظت ctdna و سفکسیم است. تأثیر ph، غلظت بافر، غلظت تربیوم، غلظت دانوفلوکساسین، دما، ترتیب افزایش معرف ها، زمان، اثر بعضی حلال آلی و سوفکتانت های مختلف بررسی شد و تحت شرایط بهینه، محدوده‏ی خطی و حد تشخیص به ترتیب ppb 3289-36 و ppb 8 برای ctdna بدست آمد. از این روش برای اندازه گیری dna در نمونه ی استاندارد، سرم انسانی و نمونه ی استخراج شده از باکتری اشرشیاکولای استفاده شد . همچنین تحت شرایط بهینه محدوده ی خطی و حد تشخیص به ترتیب ppb 400-40 و ppb 13 برای اندازه‏گیری سفکسیم بدست آمد. از روش پیشنهاد شده برای اندازه گیری سفکسیم در فرمولاسیون دارویی و سرم انسانی استفاده شد.